Determinación de la eficacia
Procedimiento de Bioensayos:
• El material biológico
Hembras de Anopheles gambiae alimentadas sin sangre, 2-5 días de edad fueron utilizados durante el estudio. Esta es una cepa standard susceptible (Kisumu, se originó a partir de Kenia) criados por muchos años en nuestro laboratorio y libre de mecanismos de resistencia a insecticidas detectables.
• Metodo de prueba de la OMS
Las pruebas de la OMS como medidas para probar la mortalidad de los mosquitos susceptibles expuestos en una pequeña cámara a un pedazo de red tratada (25x25 cm) por un tiempo de exposición de 3 minutos (Müller et al 2002;.. Ordóñez González et al 2002; OMS 1975). Con el fin de adherirse a esta breve exposición, lotes de sólo 5 hembras fueron introducidos en los conos de pruebas a la vez. Cuatro conos fueron utilizados en la muestra de una misma red. En un intervalo de 10 a 15 segundos fueron observados cada lote de 5 mosquitos.
Un total de 5 réplicas de 10 mosquitos fueron utilizados para cada muestra analizada (10x5 = 50 mosquitos). Después de las pruebas, las mujeres se agruparon en vasos de plástico (10 por cada taza) con la solución de miel suministrada durante 24 horas a 25 ° C y 80% HR. KD efecto se registró 60 minutos después de la exposición y el porcentaje de mortalidad después de 24 horas.
Los mosquitos capaces de volar se contaba como vivo. Sin embargo, se observó con frecuencia, al probar los piretroides, sobreviviendo mosquitos capaces de volar con varias piernas faltantes, a veces hasta 5. Este fenómeno relativo a la pierna de auto-sección a los piretroides es probable que ocurra en el campo, así como en el laboratorio. Por esta razón, también se registrarán los mosquitos que sobreviven con tres piernas o menos, ya que estos mosquitos no podrán sobrevivir en el campo (no es capaz de morder y / o para poner sus huevos).
Vamos a contar con ellos como "la mortalidad funcional" ( muertos + vivos con tres piernas o menos) por oposición a la mortalidad efectiva. Diferencia entre la mortalidad efectiva y la funcional es importante en algún momento y este número doble ofrece una mejor estimación del efecto letal general del insecticida
• Túneles experimentales
La prueba de túnel para medir la mortalidad y el éxito de obtención de alimentación de sangre y la búsqueda de ella en una cámara experimental (Corbel et al. 2004). El equipo básico consiste en un túnel (sección cuadrada 25x25 cm) de vidrio, 75 cm de Largo. Menos un tercio de la Largo, un marco de cartón desechable se coloca con la muestra tratada red. La superficie de la compensación "a disposición" de los mosquitos es de 400 cm cuadrados (20x20 cm), con 9 hoyos de 1 cm de diámetro colocados con precisión.
Dentro del lado pequeño, un conejillo de Indias será colocado (incapaz de moverse, pero puede morder). Al final de cada lado del túnel, una jaula de 30 cm cuadrados está equipada, cubierta con red depoliéster. En la jaula colocada en el extremo del lado largo, 100 hembras fueron introducidas a las 6 PM. Las hembras eran libres de volar en la jaula y avanzar hacia el cebo. Para llegar a la carnada, tienen que volar a lo largo de la red tratada, localizar los agujeros y pasar a través de las redes.
Entonces, los mosquitos pueden picar con facilidad al conejillo de indias. Después de alimentarse de sangre, las hembras suelen volar a la jaula al final de este compartimento y descansar. Durante la exposición, las jaulas se mantienen en un invernadero tropical a 28 ° C y 80% de humedad relativa con luz natural. A la mañana siguiente, a las 9 am, las mujeres se retiran por separado de cada lado de la jaula de cristal y se cuentan como vivo / muerto y la sangre alimentados / sin comer. Las redes con 20 lavados causan una gran mortalidad cerca del 80% y / o inhibición de la alimentación de la sangre superior al 95% son considerados por WHOPES como mosquiteros tratados con insecticidas duradera.
